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关键词： 曼氏血吸虫   循环阴极抗原   核酸适配体   指数富集配基的系统进化技术   重组原核蛋白  

摘要： 目的 筛选曼氏血吸虫循环阴极抗原（circulating cathodic antigen,CCA）特异性核酸适配体，并进行鉴定。方法 构建曼氏血吸虫循环阴极抗原的重组原核表达载体（pET-28a-CCA），诱导pET-28a-CCA蛋白表达并通过Ni-NTA柱纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析pET-28a-CCA蛋白的表达情况。以pET-28a-CCA蛋白为靶标，进行指数富集配基的系统进化技术（systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX）筛选，利用荧光定量PCR监测分析每一轮文库富集情况。经过多轮加压筛选，获得的产物通过高通量测序分析、生物信息学分析，并采用微量热泳动技术表征测定候选核酸适配体与pET-28aCCA蛋白的结合亲和力，进行分子对接。结果 双酶切鉴定和测序结果显示，pET-28a-CCA重组质粒插入约为1 044 bp的CCA基因片段。SDS-PAGE电泳结果显示，pET-28a-CCA蛋白的相对分子质量（Mr）约为43 600;SELEX筛选结果显示，第13轮筛选文库达到最佳富集。根据测序结果筛选出的9条候选核酸适配体序列，经过MST检测，有7条候选核酸适配体与pET-28a-CCA蛋白有结合亲和力。TQ-apt1的吉布斯自由能最低（ΔG=-13.09 kcal/mol）,GC含量最高（59.20%）、熔解温度最高（102.3℃）以及G-四链体得分最高（15分），TQ-apt1与pET-28a-CCA蛋白的亲和力最高，解离常数为2.1 nmol/L。结论 成功获得了pET-28a-CCA蛋白的核酸适配体。

关键词： 阿霉素   心肌损伤   炙甘草汤   细胞凋亡   氧化应激   线粒体损伤   工程化组织构建  

摘要： 背景：临床研究显示甘草汤可有效改善阿霉素导致的心肌损伤症状和体征，保护心功能，但其具体作用机制尚不明确。目的：探讨炙甘草汤保护阿霉素诱导心肌损伤的作用及机制。方法：(1)在PharmMapper、TCMSP、PubChem和BATMAN-TCM数据库中获得炙甘草汤的靶点，通过MitoCarta 3.0获取线粒体相关基因，通过GEO数据库筛选心肌损伤相关靶点，筛选交集基因。(2)细胞实验：取30只SD大鼠，给予12.15 g/(kg·d)炙甘草汤灌胃(分2次给药)，连续给药3 d。末次给药2 h后腹主动脉采血，分离血清，即得含药血清。将第10代大鼠心肌细胞(H9C2细胞)分5组干预：对照组不进行任何干预，模型组添加阿霉素干预48 h，低、中、高剂量含药血清组分别添加5%,10%,20%含药血清干预6 h，再添加阿霉素干预48 h。干预结束后，检测细胞上清乳酸脱氢酶与肌酸激酶水平、Caspase-7蛋白表达、细胞线粒体超微结构、细胞凋亡、活性氧水平及α-actinin的定位和分布。(3)动物实验：将30只C57BL/6小鼠随机分5组干预，每组6只：对照组皮下注射生理盐水，模型组及低、中、高剂量炙甘草汤组腹腔注射阿霉素(每周1次，连续注射4周)建立心肌损伤模型，同时，低、中、高剂量炙甘草汤组分别给予8.775,17.55,35.12 g/kg炙甘草汤灌胃(每天1次，连续给药4周)，对照组与模型组给于生理盐水灌胃。末次给药结束后，检测小鼠左室射血分数、血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶水平、心肌组织结构变化、心肌细胞凋亡与心肌组织Caspase-7蛋白表达。结果与结论：(1)炙甘草汤靶点、心肌损伤靶点、线粒体相关基因韦恩图显示，Caspase-7为交集基因；(2)细胞实验：与模型组比较，中、高剂量含药血清组细胞上清乳酸脱氢酶与肌酸激酶水平、活性氧水平、细胞凋亡及Caspase-7、α-actinin蛋白表达显著降低，细胞线粒体超微结构损伤明显减轻；(3)动物实验：与模型组比较，中、高剂量炙甘草汤组血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶水平、心肌细胞凋亡与Caspase-7蛋白表达显著降低，左室射血分数升高，心肌组织结构明显改善；(4)结果表明，炙甘草汤可在一定程度上防治阿霉素诱导的心肌损伤，主要表现在减轻氧化应激和线粒体损伤、抑制心肌细胞凋亡、保护心功能和改善心肌组织结构，在抑制内源性凋亡途径方面，Caspase-7可能是炙甘草汤的作用靶点。

关键词： galectin-3   结肠   溃疡性结肠炎   炎症   炎症性肠病   诊断标志物   治疗靶点  

摘要： 溃疡性结肠炎(ulceration colitis,UC)是一种病因尚未完全明确的结肠和直肠的慢性炎症性疾病。UC的早期诊断和有效治疗仍然是临床亟待解决的难题。越来越多的研究发现,半乳凝集素-3(galectin-3)参与了UC的发生发展,有可能成为UC的诊断指标和治疗靶点。Galectin-3广泛表达于结肠上皮细胞和免疫细胞中,可参与免疫调节,在炎症的发生发展中发挥着重要作用。该文对galectin-3的结构和功能进行了介绍,并对galectin-3在UC中的表达变化和所发挥的作用进行了总结和讨论。目前,多数文献报道倾向于认为galectin-3在UC中扮演促炎的角色,但仍然有部分报道持相反观点,本文对出现这种争议的原因进行了分析,为今后进一步确定galectin-3是否有可能成为UC的诊断指标和治疗靶点提供参考。

关键词： 肿瘤RNA疫苗   作用机制   递送方法   联合治疗  

摘要： 肿瘤核糖核酸（ribonucleic acid，RNA）疫苗作为新兴癌症免疫疗法，在新型冠状病毒感染期间取得技术突破，其通过精准抗原表达激活免疫应答，但RNA疫苗仍面临递送效率低及免疫原性不足等挑战。当前研究聚焦常规信使核糖核酸（messenger ribonucleic acid，mRNA）、自扩增型mRNA和环状RNA（circular RNA，circRNA）疫苗设计，结合脂质纳米颗粒（lipid nanoparticle，LNP）及聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）优化递送效率。RNA疫苗联合免疫检查点抑制剂、化疗及溶瘤病毒可展现良好疗效，但抗原筛选复杂性与储存稳定性仍制约临床应用。本文系统综述肿瘤RNA疫苗的最新临床应用进展，深入分析其技术挑战，并对未来发展方向进行展望，旨在为突破当前治疗困境提供理论依据和创新策略。

关键词： 乳腺癌   TP63   预后标志物   生物信息学   甲基化   免疫浸润分析  

摘要： 目的：探索肿瘤蛋白63(TP63)在乳腺癌（BRCA）中的表达，分析其预后价值并为BRCA患者的治疗决策作出贡献。方法：利用TCGA、GSE93601和HPA数据库分析BRCA组织中TP63 mRNA和蛋白质表达水平，并分析其与临床病理特征的关系。通过Kaplan-Meier生存分析及单因素和多因素Cox回归分析探究TP63表达对BRCA患者预后的影响。使用Limma包分析TP63高表达组和低表达组的差异表达基因并采用富集分析预测BRCA中TP63相关的功能和通路。使用SMART、cBioPortal和MethSurv工具研究BRCA中TP63 DNA甲基化状态。采用CIBERSORT算法研究BRCA中免疫细胞浸润水平与TP63表达的相关性。采用Spearman相关性分析评估TP63表达与DNA甲基化相关基因及免疫相关生物标志物表达的相关性。结果：TP63表达在BRCA中显著降低，并且与不良病理特征和不良预后相关。富集分析显示TP63参与细胞因子-细胞因子受体相互作用、紧密连接、激素信号通路、白细胞经内皮层迁移和细胞黏附分子等过程。TP63低表达可能与胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）甲基化增强相关。分析TCGA转录组数据发现，TP63高表达组的免疫细胞浸润和免疫相关生物标志物表达增加，这可能表明高表达组对免疫疗法的反应更为有利。结论：TP63在BRCA组织中低表达，有望作为独立预测BRCA预后的生物标志物，协助BRCA患者的诊断和治疗决策。

关键词： 结直肠肿瘤   结肠直肠切除术   术后并发症   误差反向传播神经网络   随机森林  

摘要： 目的 误差反向传播（BP）神经网络、随机森林预测结直肠癌根治术后并发症的效能对比分析。方法 选取2023年1月至2024年1月眉山市人民医院收治的128例行根治术治疗的结直肠癌病人为研究对象。根据受试者术后是否发生并发症分为并发症组（90例）和无并发症组（38例）。收集病人一般资料、病理学特征、围术期指标。采用t检验或χ2检验筛选出可能影响结直肠癌根治术病人术后发生并发症的因素。将受试者按照7∶3的比例分为训练集（90例）和测试集（38例），训练集用于构建BP神经网络和随机森林模型，测试集用于评估上述两种模型的预测效能。结果 128例病人中，38例病人术后发生并发症，并发症发生率为29.69%(38/128)。并发症组年龄（67.54±10.36）岁、手术时间（325.46±45.36）min高于无并发症组（63.35±10.42）岁、（268.36±46.52）min(P<0.05)，贫血（39.47%）、aCCI评分>4分（52.63%）、PNI<42.15(44.74%)占比高于无并发症组（12.22%、25.56%、12.22%）(P<0.05)。受试者操作特征曲线（ROC曲线）分析结果显示，BP神经网络和随机森林模型预测测试集结直肠癌根治术病人术后并发症的曲线下面积（AUC）分别为0.82[95%CI:(0.77,0.86)]、0.92[95%CI:(0.89,0.98)]，灵敏度分别为85.70%、94.50%，特异度分别为80.30%、90.50%，正确率分别为79.00%、88.40%，召回率分别为76.40%、90.20%，精确率分别为79.70%、90.20%。Delong检验结果显示，随机森林预测测试集结直肠癌根治术病人术后并发症的AUC大于BP神经网络，差异有统计学意义（D=-3.02,P=0.004）。结论 BP神经网络、随机森林模型对结直肠癌根治术病人术后并发症的预测效能较好，其中随机森林模型对该病病人术后发生并发症的预测效能更优，值得在临床推广应用。

关键词： 帕金森病抑郁   伏隔核   结构MRI   功能MRI  

摘要： 伴发抑郁在帕金森病患者中极为常见，极大地影响帕金森患者的生活质量及预后，而在临床上帕金森抑郁的识别和诊断的重要性仍然被严重低估。伏隔核作为边缘系统和脑中的奖赏回路的关键组成部分，其结构和功能异常改变常被视为导致抑郁症及其他精神疾病的潜在生理机制。本文伏隔核为切入点，从结构和功能MRI技术两方面展开综述并探讨在帕金森病抑郁患者中伏隔核异常的意义，以期帮助临床更好诊断，为未来的研究工作开辟新的视角和思路。

关键词： 超临界二氧化碳   布雷顿循环   两级压缩   中间冷却   低压级压比  

摘要： 针对具有两级压缩中间冷却过程的超临界二氧化碳(supercritical carbon dioxide，S-CO2)布雷顿循环，构建了2种不同布局的系统模型，探究低压级压比、分流比等关键参数对系统性能的影响。结果表明：在设计工况下，再压缩循环、主压缩机两级压缩循环和再压缩机两级压缩循环均存在最小分流比和最佳分流比，且在一定分流比范围内，主压缩机两级压缩循环的热效率高于另两个循环；当3种系统均取最佳分流比时，主压缩机两级压缩循环最大热效率可达50.95%，比常规再压缩循环和再压缩机两级压缩循环分别提升了3.10%、3.83%；在不同低压级压比下，主压缩机两级压缩循环和再压缩机两级压缩循环均存在一个最佳分流比，使系统热效率达到最大，且最大热效率随低压级压比增大而降低。

关键词： MMTV-PyMT转基因小鼠   乳腺癌   肺转移   肿瘤微环境  

摘要： 目的 研究不同周龄MMTV-PyMT乳腺癌转基因小鼠的致瘤特性及肿瘤微环境中免疫细胞的组成变化。方法 准备8组周龄在4、6、8、10、12、14、16、18周龄的MMTV-PyMT雌性小鼠（以FVB小鼠为背景）以及1组8周龄FVB雌性小鼠，对其血常规进行检测，通过组织病理学切片观察乳腺的病理变化及肺转移情况，通过流式细胞术分析血液、脾、肿瘤中的免疫细胞。结果 MMTV-PyMT小鼠4 ～ 6周龄时乳腺导管出现腺管样病变，8 ～ 9周龄时导管部分长至生长边界，此后逐渐突破腺体边界，在8 ～ 12周龄时形成早期乳腺癌，在10 ～ 14周龄时出现晚期乳腺癌的特征。在12周龄时部分小鼠肺部分出现可见转移病灶，14周龄肺部转移灶明显增多；随着周龄增长，小鼠血液中白细胞、中性粒细胞、血小板逐渐增多，而淋巴细胞、红细胞则呈逐渐下降趋势；流式细胞术提示随着周龄增长，小鼠脾、肿瘤中T细胞比例逐渐下降，血液、脾、肿瘤中MDSCs逐渐增加，肿瘤中NK细胞也逐渐增加。结论 本研究对不同周龄MMTV-PyMT小鼠模型的血常规、病理及组织中的免疫细胞进行分析，为乳腺癌恶性进展过程中肿瘤免疫微环境的动态变化提供新视角。

关键词： S100A16   恶性肿瘤   肿瘤微环境   内皮细胞   肿瘤治疗抵抗  

摘要： S100钙结合蛋白家族成员S100钙结合蛋白A16（S100 calcium-binding protein A16，S100A16）在多种恶性肿瘤存在差异表达，参与肿瘤演进，在肿瘤细胞增殖、凋亡、黏附、上皮-间质转化、迁移和侵袭中发挥重要作用，可作为不良预后因素。S100A16与肿瘤微环境中免疫细胞浸润存在关联，促使肿瘤微环境趋向免疫抑制状态，肿瘤相关内皮细胞S100A16表达水平亦与抑制性免疫微环境形成相关。此外，S100A16在肿瘤化疗抵抗中亦发挥作用。本文综述S100A16在不同肿瘤的作用机制、肿瘤免疫微环境调节、药物治疗抵抗等研究进展，旨在进一步阐明不同肿瘤的防治机制，为克服肿瘤治疗抵抗提供理论依据。