学科服务 更多>>

关键词： 六君子汤   癌相关成纤维细胞   TGF-β/Smad2   细胞凋亡   食管癌  

摘要： 目的：肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts， CAFs）是肿瘤组织中被癌细胞激活的成纤维细胞，具有成肌纤维细胞的特性。CAFs可以为肿瘤细胞提供营养支持和侵袭通道，从而帮助肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移。本文观察六君子汤对食管癌相关CAFs凋亡的影响，并探讨其分子机制，为六君子汤治疗食管癌的临床应用提供实验依据。方法： 1 MTT法检测不同浓度六君子汤对CAFs活性的影响。2 MTT法检测不同浓度TE-1条件培养基（即TE-1M）对CAFs活性的影响。3 Elisa检测六君子汤对各分组CAFs分泌转化生长因子-β1（TGF-β1）的影响。4 流式细胞术检测各分组CAFs凋亡水平。5 RT-qPCR检测六君子汤对各分组CAFs凋亡相关分子mRNA的表达水平的影响。6 Western Blot法检测六君子汤对各分组CAFs凋亡相关分子蛋白的表达水平的影响。结果： 1 MTT检测结果显示：与空白组相比，50μg/mL的六君子汤对CAFs的活性抑制无明显影响，其他浓度组对CAFs的活性均有抑制作用（P＜0.05）。2 MTT检测结果显示：与空白组相比，10%、20%和30%TE-1M对CAFs的增殖具有促进作用，其中20%浓度的TE-1M对CAFs的增殖作用最显著（P＜0.001），40%TE-1M（P＜0.05）及50%TE-1M（P＜0.01）对CAFs的增殖有明显的抑制作用。3 Elisa法检测结果显示：与空白组相比，模型组CAFs分泌TGF-β1含量下降（P＜0.001）；与模型组相比，六君子汤组TGF-β1含量显著升高（P＜0.001）；与六君子汤组相比，抑-六君子汤组（SB-431542抑制剂+六君子汤组）TGF-β1含量降低（P＜0.001）。4 流式细胞术检测结果显示：与空白组相比，模型组凋亡率无明显差异；与模型组相比，六君子汤组凋亡率显著升高（P＜0.001）；与六君子汤组相比，抑-六君子汤组凋亡率明显下降（P＜0.001）。5 PCR检测结果显示：与空白组相比，模型组Smad2、FAP基因表达升高（P＜0.01，P＜0.001）；与模型组相比，六君子汤组Smad2、Caspase3和FAP表达显著升高（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）；与六君子汤组相比，抑-六君子汤组Smad2、Caspase3和FAP明显下降（P＜0.05，P＜0.001）。6 Western Blot检测结果显示：与空白组相比，模型组Smad2蛋白表达水平下降（P＜0.01）；与模型组相比，六君子汤组Smad2和Caspase3表达显著升高（P＜0.001），FAP蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与六君子汤组相比，抑-六君子汤组Smad2、Caspase3明显下降（P＜0.01），FAP蛋白表达下降（P＜0.05）。结论：与食管癌细胞间接共培养条件下通过抑制TGF-β1/Smad2通路促进CAFs增殖；六君子汤可以通过TGF-β1/Smad2通路诱导CAFs凋亡。

关键词： 效能评估   组合赋权   动态赋权   G1-CRITIC   PIVW  

摘要： 现代战场瞬息万变，作战效能评估中传统的静态赋权方法难以捕捉态势变化，导致评估准确性受限，为此，提出了一种基于G1-CRITIC-PIVW的评估指标动态自适应赋权方法。首先采用G1序关系法和CRITIC (Criteria Importance Through Intercriteria Correlation)赋权法分别计算主观和客观权重，并通过偏差系数最小化的方法进行组合，得到最优的常权权重。随后，基于惩罚-激励型变权理论（Punishment-Incentive Variable Weight,PIVW），根据指标量化值的变化动态调整权重，以正向激励高价值指标的同时适度惩罚低价值指标。实验结果表明，本方法能够有效提高效能评估的精度和灵活性，为决策者提供更为可靠的依据。

关键词： 肿瘤   非小细胞肺癌   TTF-1   p40   共表达  

摘要： 目的 探讨TTF-1/p40共表达非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的临床病理特点。方法回顾性分析4例TTF-1/p40共表达NSCLC的临床病理资料,采用免疫组化EnVision两步法检测蛋白表达,并复习相关文献。结果 4例患者年龄66～79岁,平均71岁,均为男性。病变位于右肺2例,左肺2例,肿瘤最大径4～8 cm。镜下见肿瘤组织呈巢团状、片状排列,未见腺样结构及细胞角化,局部坏死,瘤细胞呈卵圆形或短梭形,胞质中等,嗜酸性,核异型性明显,核分裂象易见,间质内见较多炎细胞浸润。免疫表型:肿瘤细胞TTF-1、p40和p63均弥漫阳性,CK5/6(3/3)、CK7(3/4)、CK(1/1)和NapsinA(0/2)均阳性,Ki67增殖指数为30%～90%。例1二代测序结果示TP53、ALK突变,MYC拷贝数扩增,CDKN2A缺失。结论NSCLC中TTF-1/p40共表达罕见,可能是一种新的实体型肺癌,其临床分期晚、预后差,临床和病理医师需提高重视。

关键词： 山羊支原体山羊肺炎亚种   山羊传染性胸膜肺炎   HP65蛋白   原核表达   间接ELISA  

摘要： 为建立山羊支原体山羊肺炎亚种（Mccp）的抗体检测方法，筛选Mccp潜在诊断靶标——假定膜蛋白HP65，以纯化的rHP65蛋白为包被抗原，通过优化条件，建立间接ELISA抗体检测方法，并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估和临床应用。结果显示，rHP65蛋白大小约72 kDa；Western-blot证实该蛋白与Mccp阳性血清具有良好的反应性。建立的ELISA方法的最佳条件为：抗原包被量为180 ng/孔，37℃孵育2 h后4℃过夜包被，10 g/L BSA 37℃封闭90 min，血清1∶200稀释后37℃孵育1 h，酶标二抗1∶10 000稀释后37℃孵育1 h；底物在37℃显色10 min。与绵羊肺炎支原体、山羊支原体山羊亚种、丝状支原体山羊亚种、小反刍兽疫病毒和衣原体的阳性血清均无交叉反应，具有良好的特异性，敏感性达1∶10240。批内和批间重复性变异系数均低于10%。应用该方法对Mccp免疫、感染血清和临床血清进行检测，疫苗免疫7 d可检测到血清抗体转阳、人工感染血清7～14 d可检测到血清阳性，187份临床血清中有102份阳性、85份阴性。以上结果表明，基于HP65蛋白建立的ELISA方法可用于山羊传染性胸膜肺炎疫苗免疫抗体检测，为该病临床诊断试剂盒开发奠定了基础。

关键词： 辣椒   倍性鉴定   流式细胞仪   花粉活力   染色体计数法  

摘要： 为探索出一种准确、高效、适用的辣椒花药培养再生植株的倍性鉴定方法，以来自10个基因型的60个辣椒花药培养再生株系为试材，采用植株育性检测法和DNA流式细胞仪检测法，并结合根尖细胞压片染色体计数法进行倍性鉴定，比较不同方法的优缺点。结果表明，DNA流式细胞仪倍性鉴定准确率为96.67%，该方法快速，便捷，但鉴定成本高，且易出现偏峰现象；花粉活力检测法在判断再生植株染色体奇偶倍性方面准确率为100%，但不能甄别再生植株的具体染色体倍性。花粉活力检测法和DNA流式细胞仪检测法结合使用可明显降低鉴定成本，提高准确率和效率，即对已现蕾的株系，采用花粉活力检测法确定其染色体奇偶倍性，便于早期进行染色体加倍处理；对现蕾较晚的株系，宜在苗期采用DNA流式细胞仪检测法。

关键词： 自适应空间划分   特征融合   注意力引导   NeRF模型   城市场景  

摘要： 基于城市神经辐射场（NeRF）场景重建的主流方法是将整个场景分割为多个区域，但在无人机航拍场景中，一旦飞行轨迹变化导致场景分布不均时，现有方法的分割效率低下，难以处理同一场景不同高度拍摄的图像细节，导致渲染质量不佳。为此，提出一种端到端的注意力引导框架。首先，利用相机位姿进行自适应空间划分，解决不均匀场景分割的效率问题；其次，从不同高度图像中提取、融合目标视图最相关的特征来增强细节，解决航拍场景高保真渲染问题。实验表明，所提模型在城市场景数据集56Leonardv、SCUTic上均取得了最佳性能，执行渲染的速度相较于目前最高效的方法提升了65%以上。

关键词： 亚精胺   骨溶解   破骨细胞   炎症  

摘要： 目的·探讨亚精胺（spermidine,SPD）在体内和体外对炎症性骨溶解的抑制作用。方法·采用CCK-8法检测不同浓度SPD对RAW264.7巨噬细胞的活性影响；采用二氯二氢荧光素乙酰酯（dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFHDA）和二氢乙锭（dihydroethidium,DHE）染色液分别检测SPD对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）激活的RAW264.7细胞内活性氧（reactiveoxygenspecies, ROS）水平；采用反转录实时荧光定量PCR (reversetranscriptionreal-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测SPD对LPS激活的RAW264.7细胞内促炎相关基因表达的影响；采用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP）染色检测SPD对小鼠原代骨髓来源巨噬细胞（bone marrowderived macrophage,BMM）向破骨细胞分化的影响，并进一步通过RT-qPCR分析SPD对BMM诱导分化后与破骨细胞分化和功能相关基因表达的影响。构建LPS诱导的小鼠颅骨骨溶解模型，通过Micro-CT分析以及组织切片苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,H-E）染色、TRAP染色评价SPD对炎症性骨溶解的治疗效果。结果·CCK-8结果显示，SPD达到1 000μmol/L时，对RAW264.7细胞仍无明显细胞毒性；ROS检测结果显示，SPD可以显著抑制LPS引起的巨噬细胞内ROS水平的升高；RT-qPCR结果显示，SPD可以抑制LPS诱导的促炎相关基因的表达。TRAP染色和RT-qPCR结果显示，SPD可有效抑制核因子κB受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL）诱导的BMM向破骨细胞分化，以及降低破骨细胞分化和功能相关基因的表达。在小鼠颅骨骨溶解模型中，Micro-CT结果显示，SPD处理组颅骨骨体积分数和骨矿物质密度均较LPS组显著升高；组织切片染色结果显示，SPD处理组炎症细胞浸润减少，破骨细胞数量减少，组织受损程度较轻。结论·SPD在体外能够抑制巨噬细胞的炎症反应，以及RANKL诱导的破骨细胞分化；在体内，SPD可改善由LPS诱导的小鼠炎症性颅骨骨溶解。

关键词： 域适应   多站点   隐私保护   类别感知   无监督  

摘要： 静息态功能性磁共振成像在多站点研究中被广泛用于分析精神疾病。然而，由于不同站点的扫描协议差异，数据异质性问题显著，影响了跨站点分析的可靠性。现有的多站点域适应方法通常依赖源数据，从而带来潜在的隐私泄露风险。而仅利用源模型的隐私保护方案在目标域决策边界附近存在表现不佳的问题。为解决上述问题，一种名为多源融合域感知生存分布模型（Multi-source fusion Domain-aware Survival distribution Model，MDSM）的框架被提出。具体来说，MDSM通过域间融合模块结合源预训练模型和目标域数据，实现带有隐私保护的域适应。并设计了域感知生存分布模块，它包含两个评价指标：一是量化域内标签分布不确定性的边界样本生存密度，它反映了模型的域适应程度；二是评估域间模型可移植性的域转移感知得分，它反映了模型对不同域特征的识别能力。这两个指标动态地为多源域模型分配最优组合权重，实现对多源域的自适应微调，从而增强模型预测的鲁棒性，缓解决策边界附近表现不佳的问题。在ABIDE数据集上的实验结果表明，MDSM取得71.03%的平均准确度，优于最先进的隐私保护域适应方法，在自闭症谱系障碍的多站点域适应识别任务中提高了诊断精度，展现出良好的临床应用潜力。

关键词： 毫米压痕测试   Oliver-Pharr理论   致密砂岩   弹性模量  

摘要： 针对深部岩石工程中传统力学实验存在的取芯困难、数据离散性大等问题，本研究提出一种基于循环加卸载压入实验测定岩石弹性模量的方法。通过在单个压点开展循环压入，获取丰富的加卸载力-位移曲线，结合Oliver-Pharr理论计算弹性模量，并系统探究最大载荷、加载速率和保载时间对致密砂岩弹性模量测量结果的影响。实验结果表明：较大的压入载荷会导致计算结果偏大；加载速率对结果影响较小，低加载速率有助于降低测试误差；较长的保载时间可使计算结果更平稳。综合分析得出，采用最大载荷50N、加载速率0.03mm/min、保载时间10s的实验条件时，压入弹性模量与单轴压缩基准值误差最小，数据稳定性最佳。与传统压痕实验相比，该方法实验流程简便高效，数据获取丰富，结果曲线平滑稳定，准确率更高，无需完整岩芯，可利用钻井岩屑快速测试，为深部岩石工程设计和施工提供了准确的岩石力学参数，具有重要的工程应用价值。

关键词： 葛根素   非酒精性脂肪性肝病   氧化应激   炎症   核因子E2相关因子2  

摘要： 目的：探讨葛根素（Pue）对高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的改善作用，并阐明其可能的作用机制。方法：将36只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量Pue组(20.0 mg·kg-1)、中剂量Pue组(40.0 mg·kg-1)、高剂量Pue组(80.0 mg·kg-1)和阳性药阿托伐他汀钙（AT）组(AT 10.0 mg·kg-1)，每组6只。除对照组小鼠给予正常饮食外，其余各组小鼠均给予高脂饮食喂养以建立NAFLD模型。测量各组小鼠体质量，并计算肝指数；采用HE染色观察各组小鼠肝组织病理形态表现；采用生化试剂盒测定各组小鼠血清和肝组织中总胆固醇（TC）及甘油三酯（TG）水平，血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平，肝组织中丙二醛（MDA）水平以及超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，并检测肝组织中炎症因子[白细胞介素6 （IL-6）、白细胞介素1β （IL-1β）和肿瘤坏死因子α （TNF-α）]水平。基于网络药理学框架，通过整合PubChem和SwissTargetPrediction等数据库预测Pue的潜在治疗靶点，结合GeneCards等平台获取的NAFLD相关疾病靶点构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，并进行基因本体论（GO）功能注释和京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析。采用Western blotting法检测各组小鼠肝组织中Kelch样ECH关联蛋白1 （Keap1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1 （HO-1）和醌氧化还原酶1 （NQO1）蛋白表达情况。另取30只小鼠分为对照组、模型组、Pue组(80.0 mg·kg-1Pue灌胃)、模型+Nrf2抑制剂ML385组(30.0 mg·kg-1ML385腹腔注射)和Pue+Nrf2抑制剂ML385组(80.0 mg·kg-1Pue灌胃+30 mg·kg-1ML385腹腔注射)，每组6只。再次检测上述氧化应激和炎症指标以及相关蛋白表达情况。结果：与对照组比较，模型组小鼠体质量和肝指数明显升高（P<0.01）；与模型组比较，低、中和高剂量Pue组及阳性药组小鼠体质量以及肝指数明显降低（P<0.05或P<0.01）。HE染色，与对照组比较，模型组小鼠肝组织出现明显的脂质积累和病理损伤；与模型组比较，低、中和高剂量Pue组及阳性药组小鼠肝组织的脂滴积累情况以及病理损伤均有不同程度的改善。与对照组比较，模型组小鼠肝组织中TC、TG、IL-6、IL-1β、TNF-α和MDA水平以及血清TC、TG、ALT和AST水平明显升高（P<0.01），肝组织中SOD和GSH-Px活性明显降低（P<0.01）；与模型组比较，低、中和高剂量Pue组及阳性药组小鼠肝组织中TC、TG、IL-6、IL-1β、TNF-α和MDA水平以及血清TC、TG、ALT和AST水平明显降低（P<0.05或P<0.01），肝组织中SOD和GSH-Px活性明显升高（P<0.05或P<0.01）。网络药理学分析筛选获得Pue治疗NAFLD的核心靶点包括Nrf2、TNF和IL-6等，预测Pue可能通过调控氧化应激、炎症和凋亡等途径发挥作用。Western blotting法检测，与对照组比较，模型组小鼠肝组织中Keap1蛋白表达水平升高（P<0.01）,Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平均降低（P<0.01）；与模型组比较，低、中和高剂量Pue组及阳性药组小鼠肝组织中Keap1蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平均升高（P<0.05或P<0.01）。Nrf2抑制剂ML385干预后，与Pue组比较，Pue+ML385组小鼠肝组织中IL-6、IL-1β、TNF-α和MDA水平均明显升高（P<0.05）,SOD和GSH-Px活性均明显降低（P<0.05或P<0.01），肝组织中Keap1蛋白表达水平升高（P<0.01）,Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）。结论：Pue能够改善NAFLD小鼠的脂质代谢和肝功能，减轻肝脏损伤，提高肝组织抗氧化能力，并减少炎症因子释放，其机制可能与激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路有关。